မြွေအဆိပ်တွင် carboxyl ester bonds များကို ဟိုက်ဒရောလစ်ဖြစ်စေသော အင်ဇိုင်းများ ပါဝင်သည်။Hydrolysis အတွက် အလွှာများမှာ phospholipids၊ acetylcholine နှင့် aromatic acetate တို့ဖြစ်သည်။ဤအင်ဇိုင်းများတွင် phospholipase၊ acetylcholinesterase နှင့် aromatic esterase သုံးမျိုးပါဝင်သည်။မြွေအဆိပ်ရှိ Arginine esterase သည် ပေါင်းစပ်ဖွဲ့စည်းထားသော arginine သို့မဟုတ် lysine ကို hydrolyze လုပ်နိုင်သည်၊ သို့သော် ၎င်းသည် သဘာဝတွင် ပရိုတင်း peptide bonds များကို အဓိကအားဖြင့် ဟိုက်ဒရောလစ်ဖြစ်စေသောကြောင့် ၎င်းသည် protease နှင့်သက်ဆိုင်သည်။ဤနေရာတွင် ဆွေးနွေးထားသော အင်ဇိုင်းများသည် ester substrate များပေါ်တွင်သာ လုပ်ဆောင်ကြပြီး မည်သည့် peptide bond တွင်မဆို လုပ်ဆောင်နိုင်မည်ဖြစ်သည်။ဤအင်ဇိုင်းများထဲတွင် acetylcholinesterase နှင့် phospholipase တို့၏ ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာလုပ်ဆောင်ချက်များသည် ပို၍အရေးကြီးပြီး အပြည့်အဝလေ့လာထားပြီးဖြစ်သည်။အချို့သောမြွေအဆိပ်များသည် p-nitrophenyl ethyl ester၊ a – သို့မဟုတ် P-naphthalene acetate နှင့် indole ethyl ester တို့ကို ဟိုက်ဒရောလစ်ဖြစ်စေသည့် ပြင်းထန်သောအနံ့အသက် esterase လုပ်ဆောင်ချက်ရှိသည်။ဤလုပ်ဆောင်ချက်သည် လွတ်လပ်သော အင်ဇိုင်းတစ်ခုမှ ထုတ်လုပ်ခြင်း ရှိ၊ မရှိ မသိရသေးသော်လည်း ၎င်း၏ ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာ အရေးပါမှုကို မဆိုထားနှင့် carboxylesterase ၏ ဘေးထွက်ဆိုးကျိုး လူသိများသည်။Agkistrodon halys Japonicus ၏အဆိပ်ကို p-nitrophenyl ethyl ester နှင့် indole ethyl ester တို့နှင့် တုံ့ပြန်သောအခါ၊ p-nitrophenol နှင့် indole phenol တို့၏ ဟိုက်ဒရောလစ်အက်ဆစ်များကို မတွေ့ရှိရပါ။ဆန့်ကျင်ဘက်အနေနှင့်၊ အဆိုပါ esters များသည် မြွေဟောက် Zhoushan အမျိုးအစားခွဲများဖြစ်သော မြွေအဆိပ်နှင့် Bungarus multicinctus မြွေအဆိပ်တို့နှင့် တုံ့ပြန်ပါက ၎င်းတို့သည် လျင်မြန်စွာ ဟိုက်ဒရောလစ်ဖြစ်သွားမည်။အဆိုပါမြွေဟောက်အဆိပ်များတွင် အထက်ဖော်ပြပါအလွှာများ၏ hydrolysis အတွက်တာဝန်ရှိနိုင်သည့် အားကောင်းသော cholinesterase လုပ်ဆောင်ချက်ရှိကြောင်း သိရှိရပါသည်။တကယ်တော့ Mclean et al ။Cobra မိသားစုမှ မြွေအဆိပ် အများအပြားသည် indole ethyl ester၊ naphthalene ethyl ester နှင့် butyl naphthalene ester တို့ကို hydrolyze လုပ်နိုင်သည်ဟု (၁၉၇၁) က ဖော်ပြခဲ့သည်။မြွေဟောက် မြွေဟောက် လည်ပင်း အနက်ရောင် မြွေဟောက် ၊ အနက်ရောင် မြွေဟောက် ၊ ရွှေမြွေဟောက် ၊ အီဂျစ် မြွေဟောက် ၊ မြွေဟောက် ၊ ရွှေမြွေဟောက် ၊ အနက်ရောင် mamba နှင့် နှုတ်ခမ်းဖြူ မြွေဟောက် ( D. aw အရှေ့ဘက် တောင်စောင်း မြွေဟောက် များကို သိနေသေးသည် ။
မြွေအဆိပ်သည် သွေးရည်ကြည်တွင် cholinesterase လုပ်ဆောင်ချက်ကို ဆုံးဖြတ်ရန်အတွက် အလွှာဖြစ်သည့် methyl indole ethyl ester ကို ဟိုက်ဒရောလစ်ဖြစ်စေနိုင်သော်လည်း ဤမြွေဆိပ်သည် cholinesterase လုပ်ဆောင်ချက်ကို မပြသပါ။၎င်းသည် cholinesterase နှင့်မတူသော မြွေဟောက်အဆိပ်တွင် အမည်မသိ esterase ရှိကြောင်းပြသသည်။ဤအင်ဇိုင်း၏သဘောသဘာဝကိုနားလည်ရန်၊ နောက်ထပ်ခွဲထုတ်ခြင်းလုပ်ငန်းကိုလိုအပ်သည်။
၁။ Phospholipase A2
(ဈ) ခြုံငုံသုံးသပ်ချက်
Phospholipase သည် glyceryl phosphate ကို hydrolyze လုပ်နိုင်သောအင်ဇိုင်းတစ်ခုဖြစ်သည်။သဘာဝတွင် phospholipase အမျိုးအစား ၅ မျိုးရှိပြီး phospholipase A2 နှင့် phospholipase၊
A. , phospholipase B, phospholipase C နှင့် phospholipase D. မြွေအဆိပ်တွင် အဓိကအားဖြင့် phospholipase A2 (PLA2) ပါ၀င်သည်၊ အချို့သောမြွေဆိပ်များတွင် phospholipase B ပါဝင်ပြီး အခြား phospholipases များကို တိရစ္ဆာန်တစ်ရှူးများနှင့် ဘက်တီးရီးယားများတွင် အဓိကတွေ့ရှိရပါသည်။ပုံ 3-11-4 သည် substrate hydrolysis တွင် ဤ phospholipases များ၏ လုပ်ဆောင်ချက်ကို ပြသည်။
phospholipases များထဲတွင် PLA2 ကို ပိုမိုလေ့လာခဲ့သည်။၎င်းသည် မြွေအဆိပ်တွင် လေ့လာအများဆုံး အင်ဇိုင်း ဖြစ်နိုင်သည်။၎င်း၏ substrate သည် Sn-3-glycerophosphate ၏ဒုတိယအနေအထားရှိ ester bond ဖြစ်သည်။ဤအင်ဇိုင်းကို မြွေအဆိပ်၊ ပျားအဆိပ်၊ ကင်းမြီးကောက်အဆိပ်နှင့် တိရိစ္ဆာန်တစ်သျှူးများတွင် ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့် တွေ့ရှိရပြီး PLA2 ကို မြွေမျိုးစု လေးမျိုးတွင် ပေါများပါသည်။ဤအင်ဇိုင်းသည် သွေးနီဥဆဲလ်များကို ကွဲစေပြီး သွေးပြန်ကြောခြင်းကို ဖြစ်စေသောကြောင့်၊ ၎င်းကို "ဟေမိုလီဆင်" ဟုခေါ်သည်။အချို့လူများက PLA2 hemolytic lecithinase ဟုခေါ်သည်။
Ludeeke သည် မြွေအဆိပ်ကို အင်ဇိုင်းများမှတဆင့် lecithin တွင် လုပ်ဆောင်ခြင်းဖြင့် hemolytic ဒြပ်ပေါင်းကို ထုတ်လုပ်နိုင်သည်ကို တွေ့ရှိခဲ့သည်။နောက်ပိုင်းတွင်, Delezenne et al.မြွေဟောက်အဆိပ်သည် မြင်းသွေးရည်ကြည် သို့မဟုတ် အနှစ်အပေါ်တွင် သက်ရောက်သောအခါ၊ ၎င်းသည် ဟေမိုလိုင်ဓာတ်တစ်ခုအဖြစ် ဖြစ်ပေါ်လာကြောင်း သက်သေပြခဲ့သည်။PLA2 သည် erythrocyte အမြှေးပါး၏ phospholipids များပေါ်တွင် တိုက်ရိုက်လုပ်ဆောင်နိုင်ပြီး erythrocyte အမြှေးပါး၏ဖွဲ့စည်းပုံကို ဖျက်ဆီးကာ တိုက်ရိုက်သွေးပြန်ကြောခြင်းကို ဖြစ်စေနိုင်သည်ဟု ယခုသိရှိရပါသည်။၎င်းသည် သွေးနီဥများကို သွယ်ဝိုက် hemolysis ထုတ်လုပ်ရန် hemolytic lecithin ထုတ်လုပ်ရန် သွေးရည်ကြည် သို့မဟုတ် ဖြည့်စွက်လက်ဆီသင်ကို လည်း လုပ်ဆောင်နိုင်သည်။PLA2 သည် မြွေအဆိပ် မိသားစုလေးခုတွင် ပေါများသော်လည်း မြွေအဆိပ်အမျိုးမျိုးရှိ အင်ဇိုင်းများ၏ ပါဝင်မှုသည် အနည်းငယ်ကွဲပြားပါသည်။လိပ်မြွေ (C
မြွေအဆိပ်သည် အားနည်းသော PLA2 လုပ်ဆောင်ချက်ကိုသာ ပြသသည်။ဇယား 3-11-11 သည် တရုတ်နိုင်ငံရှိ အဆိပ်ပြင်းမြွေများ၏ အဓိကအဆိပ် ၁၀ ခု၏ PLA2 လုပ်ဆောင်ချက်ကို နှိုင်းယှဉ်ဖော်ပြသည်။
ဇယား 3-11-11 တရုတ်နိုင်ငံရှိ မြွေဆိပ် 10 မျိုး၏ phospholipase VIII လှုပ်ရှားမှုများကို နှိုင်းယှဉ်ခြင်း။
မြွေအဆိပ်
အဆီထုတ်ခြင်း။
Aliphatic အက်ဆစ်၊
Cjumol/mg)
Hemolytic လှုပ်ရှားမှု CHU50/^ g * ml)
မြွေအဆိပ်
ဖက်တီးအက်ဆစ်ကိုထုတ်လွှတ်ပါ။
(^raol/mg)
Hemolytic လှုပ်ရှားမှု “(HU50/ftg * 1111)
Najanaja atra
၉။ ၆၂
ဆယ့်တစ်
Micracephal ophis
ငါးမှတ် သုည
kalyspallas
၈။ ၆၈
နှစ်ထောင်ရှစ်ရာ၊
gracilis
V, acutus
၇။ ၅၆
** #
Ophiophagus ဟန္န
သုံးမှတ်ရှစ်နှစ်
တစ်ရာ့လေးဆယ်
Bnugarus fasctatus
၇၊၅၆
နှစ်ရာရှစ်ဆယ်
B. multicinctus
တစ်မှတ်ကိုးခြောက်
နှစ်ရာရှစ်ဆယ်
Viper a Russelli
ခုနစ်မှတ် သုညသုံး
T, mucrosquamatus
တစ်အချက် ရှစ်ငါး
Siamensis
T. stejnegeri
0. ၉၇
(၂) ခွဲခြားခြင်းနှင့် သန့်စင်ခြင်း။
မြွေအဆိပ်တွင် PLA2 ၏ပါဝင်မှုသည် ကြီးမားပြီး ၎င်းသည် အပူ၊ အက်စစ်၊ အယ်လကာလီနှင့် denaturant တို့အတွက် တည်ငြိမ်သောကြောင့် PLA2 ကို သန့်စင်ရန်နှင့် ခွဲခြားရလွယ်ကူစေရန်။အသုံးများသောနည်းလမ်းမှာ အဆိပ်စိမ်းပေါ်ရှိ ဂျယ်စစ်ထုတ်ခြင်းကို ဦးစွာပြုလုပ်ပြီးနောက် အိုင်းယွန်းလဲလှယ်ခရိုမာတီရိုဂရမ်ကို လုပ်ဆောင်ပြီး နောက်တစ်ဆင့်ကို ထပ်ခါထပ်ခါ ပြုလုပ်နိုင်သည်။ion-exchange chromatography ပြီးနောက် PLA2 ၏ အေးခဲ-အခြောက်ခံခြင်းသည် ပေါင်းစည်းမှုကို မဖြစ်စေသင့်ပါ၊ အဘယ်ကြောင့်ဆိုသော် အအေးခံခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်သည် PLA2 ၏ စုစည်းမှုကို ဖြစ်စေသည့် အရေးကြီးသောအချက်ဖြစ်သည့် စနစ်အတွင်းရှိ အိုင်ယွန်အစွမ်းသတ္တိကို မကြာခဏတိုးပွားစေသောကြောင့် သတိပြုသင့်သည်။အထက်ဖော်ပြပါ ယေဘုယျနည်းလမ်းများအပြင်၊ အောက်ပါနည်းလမ်းများကိုလည်း လက်ခံကျင့်သုံးခဲ့သည်- ① Wells et al.② PLA2 ၏ အလွှာဆိုင်ရာ analogue ကို ဆက်စပ်မှုရှိသော ခရိုမာတိုဂရာအတွက် ligand အဖြစ် အသုံးပြုခဲ့သည်။ဤ ligand သည် Ca2+ ဖြင့် မြွေအဆိပ်တွင် PLA2 နှင့် ချိတ်နိုင်သည်။EDTA ကို အများအားဖြင့် သာလွန်ကောင်းမွန်သော အဖြစ် အသုံးပြုကြသည်။Ca2+ ကို ဖယ်ရှားပြီးနောက်၊ PLA2 နှင့် ligand အကြား ဆက်နွယ်မှု လျော့နည်းသွားကာ ၎င်းကို ligand နှင့် ခွဲထုတ်နိုင်သည်။အခြားသူများသည် 30% အော်ဂဲနစ်ပျော်ရည် သို့မဟုတ် 6mol/L ယူရီးယားကို သာလွန်ကောင်းမွန်သောအဖြစ် အသုံးပြုကြသည်။③ Hydrophobic chromatography ကို PheiiylSephar0SeCL-4B ဖြင့် cardiotoxin တွင် သဲလွန်စ PLA2 ကိုဖယ်ရှားရန် လုပ်ဆောင်ခဲ့သည်။④ PLA2 တွင် Affinity chromatography လုပ်ဆောင်ရန် Antibody ကို ligand အဖြစ် အသုံးပြုခဲ့သည်။
ယခုအချိန်အထိ PLAZ မြွေဆိပ်အမြောက်အများကို သန့်စင်ပြီးပါပြီ။Tu et al ။(1977) တွင် PLA2 ကို 1975 ခုနှစ်မတိုင်မီ မြွေအဆိပ်မှ သန့်စင်သော PLA2 တွင်ဖော်ပြထားပါသည်။ မကြာသေးမီနှစ်များအတွင်း PLA2 ကို ခွဲခြားခြင်းနှင့် သန့်စင်ခြင်းဆိုင်ရာ ဆောင်းပါးအများအပြားကို နှစ်စဉ်နှစ်တိုင်း အစီရင်ခံခဲ့သည်။ဤတွင်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် တရုတ်ပညာရှင်များမှ PLA ကို ခွဲခြားခြင်းနှင့် သန့်စင်ခြင်းအပေါ် အာရုံစိုက်ပါသည်။
Chen Yuancong et al ။(၁၉၈၁) ခုနှစ်တွင် ၎င်းတို့၏ isoelectric အမှတ်များအလိုက် အက်စစ်ဓာတ်၊ ကြားနေနှင့် အယ်ကာလိုင်း PLA2 ဟူ၍ ခွဲခြားနိုင်သည့် Zhejiang ရှိ Agkistrodon halys Pallas ၏ အဆိပ်မှ PLA2 မျိုးစိတ် ၃ ခုကို ခွဲခြားထားသည်။၎င်း၏အဆိပ်သင့်မှုအရ၊ ကြားနေ PLA2 သည် presynaptic neurotoxin Agkistrodotoxin အဖြစ်သတ်မှတ်ထားသော အဆိပ်ပိုပါသည်။Alkaline PLA2 သည် အဆိပ်နည်းပြီး အက်စစ်ဓာတ် PLA2 သည် အဆိပ်သင့်မှု မရှိသလောက်ဖြစ်သည်။Wu Xiangfu et al ။(1984) မော်လီကျူးအလေးချိန်၊ အမိုင်နိုအက်ဆစ်ဖွဲ့စည်းမှု၊ N-terminal၊ isoelectric point၊ အပူတည်ငြိမ်မှု၊ အင်ဇိုင်းလုပ်ဆောင်ချက်၊ အဆိပ်သင့်မှုနှင့် hemolytic လုပ်ဆောင်မှုအပါအဝင် PLA2 သုံးခု၏ဝိသေသလက္ခဏာများကို နှိုင်းယှဉ်ခဲ့သည်။ရလဒ်များက ၎င်းတို့တွင် ဆင်တူသော မော်လီကျူးအလေးချိန်နှင့် အပူတည်ငြိမ်မှု ရှိသော်လည်း အခြားရှုထောင့်များတွင် သိသာထင်ရှားသော ကွဲပြားမှုများ ရှိသည်ကို ပြသခဲ့သည်။အင်ဇိုင်းလုပ်ဆောင်ချက်၏ရှုထောင့်တွင်၊ အက်ဆစ်အင်ဇိုင်းလုပ်ဆောင်ချက်သည် အယ်ကာလိုင်းအင်ဇိုင်းလုပ်ဆောင်ချက်ထက် ပိုမိုမြင့်မားသည်။ကြွက်နီဥများပေါ်ရှိ အယ်ကာလိုင်းအင်ဇိုင်း၏ hemolytic အကျိုးသက်ရောက်မှုသည် အပြင်းထန်ဆုံးဖြစ်ပြီး၊ နောက်တွင် ကြားနေအင်ဇိုင်းနှင့် အက်ဆစ်ဓာတ်မခဲနိုင်သော အင်ဇိုင်းများဖြစ်သည်။ထို့ကြောင့်၊ PLAZ ၏ hemolytic အကျိုးသက်ရောက်မှုသည် PLA2 မော်လီကျူး၏တာဝန်ခံမှုနှင့်ဆက်စပ်နေသည်ဟုယူဆရသည်။Zhang Jingkang et al ။(၁၉၈၁) တွင် Agkistrodotoxin ပုံဆောင်ခဲများကို ပြုလုပ်ခဲ့သည်။Tu Guangliang et al ။(1983) တွင် isoelectric point 7 ရှိသော အဆိပ်သင့် PLA ကို အစီရင်ခံပါသည်။ 6 ကို Fujian မှ Vipera rotundus ၏ အဆိပ်မှ ခွဲထုတ်ပြီး ၎င်း၏ ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာနှင့် ဓာတုဂုဏ်သတ္တိများ၊ အမိုင်နိုအက်ဆစ်ပါဝင်မှုနှင့် N တွင် အမိုင်နိုအက်ဆစ် အကြွင်းအကျန် 22 ခု၏ စည်းစိမ်၊ - terminal ကိုဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။Li Yuesheng et al ။(၁၉၈၅) တွင် Fujian ရှိ Viper rotundus အဆိပ်မှ နောက်ထပ် PLA2 ကို ခွဲထုတ်ပြီး သန့်စင်ခဲ့သည်။PLA2 * ၏ subunit သည် 13 800 ၊ isoelectric point သည် 10.4 ဖြစ်ပြီး တိကျသော လုပ်ဆောင်မှုမှာ 35/xnioI/miri mg ဖြစ်သည်။ လက်ဆီသင်သည် အလွှာအနေဖြင့်၊ အင်ဇိုင်း၏ အကောင်းဆုံး pH မှာ 8.0 ဖြစ်ပြီး အကောင်းဆုံးအပူချိန်မှာ 65°C ဖြစ်သည်။ LD5 ကို ကြွက်များတွင် အကြောထဲ ထိုးသွင်းသည်။၎င်းသည် 0.5 ± 0.12mg/kg ဖြစ်သည်။ဤအင်ဇိုင်းသည် သိသာထင်ရှားသော သွေးခဲခြင်း နှင့် သွေးတွင်းသကြားဓာတ် သက်ရောက်မှုရှိသည်။အဆိပ်သင့် PLA2 မော်လီကျူးတွင် အမိုင်နိုအက်ဆစ် ၁၈ မျိုး၏ အကြွင်းအကျန် ၁၂၃ ခု ပါဝင်သည်။မော်လီကျူးတွင် cysteine (14)၊ aspartic acid (14) နှင့် glycine (12) ကြွယ်ဝသော်လည်း methionine တစ်မျိုးတည်းသာ ပါဝင်ပြီး ၎င်း၏ N-terminal သည် serine residue ဖြစ်သည်။Tuguang မှခွဲထုတ်ထားသော PLA2 နှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက၊ isoenzymes နှစ်ခု၏ မော်လီကျူးအလေးချိန်နှင့် အမိုင်နိုအက်ဆစ်ကျန်များ အရေအတွက်သည် အလွန်ဆင်တူပြီး အမိုင်နိုအက်ဆစ်ပါဝင်မှုမှာလည်း အလွန်ဆင်တူသော်လည်း aspartic acid နှင့် proline အကြွင်းအကျန်များ၏ အရေအတွက်မှာ အနည်းငယ်ကွာခြားပါသည်။Guangxi မြွေဟောက်မြွေဟောက်အဆိပ်တွင် PLA2 ကြွယ်ဝစွာပါရှိသည်။Shu Yuyan et al ။(၁၉၈၉) တွင် မူလအဆိပ်ထက် ၃.၆ ဆ ပိုမိုမြင့်မားသော လုပ်ဆောင်ချက်တစ်ခု၊ မော်လီကျူးအလေးချိန် 13000၊ အမိုင်နိုအက်ဆစ် အကြွင်းအကျန် 122 ခု၊ isoelectric point 8.9 နှင့် အပူတည်ငြိမ်မှု ကောင်းမွန်သည့် အဆိပ်မှ (၁၉၈၉) မှ PLA2 ကို ခွဲထုတ်ခဲ့သည်။သွေးနီဥများအပေါ် အခြေခံ PLA2 ၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုကို အီလက်ထရွန် အဏုကြည့်မှန်ဘီလူးဖြင့် လေ့လာခြင်းမှ ၎င်းသည် လူ့သွေးနီဥဆဲလ်အမြှေးပါးအပေါ် သိသာထင်ရှားစွာ အကျိုးသက်ရောက်မှုရှိသော်လည်း ဆိတ်သွေးနီဆဲလ်များအပေါ် သိသာထင်ရှားသော အကျိုးသက်ရောက်မှုမရှိသည်ကို တွေ့နိုင်ပါသည်။ဤ PLA2 သည် လူသားများ၊ ဆိတ်များ၊ ယုန်များနှင့် ဂီနီဝက်များတွင် သွေးနီဥများ၏ electrophoretic အရှိန်အဟုန်အပေါ် သိသာထင်ရှားစွာ ဆုတ်ယုတ်စေပါသည်။Chen et al ။ဤအင်ဇိုင်းသည် ADP၊ ကော်လာဂျင်နှင့် ဆိုဒီယမ် arachidonic အက်ဆစ်တို့မှ ဖြစ်ပေါ်လာသော သွေးဥများစုပုံခြင်းကို ဟန့်တားနိုင်သည်။PLA2 အာရုံစူးစိုက်မှုသည် 10/xg/ml~lOOjug/ml ဖြစ်သောအခါ၊ platelet စုစည်းမှုကို လုံးဝ ဟန့်တားထားသည်။ဆေးကြောထားသော platelets ကို ပစ္စည်းများအဖြစ် အသုံးပြုပါက PLA2 သည် 20Mg/ml ၏ ပြင်းအား တွင် စုစည်းမှုကို မတားစီးနိုင်ပါ။အက်စပရင်သည် ဆဲလ်များပေါ်တွင် PLA2 ၏အကျိုးသက်ရောက်မှုကို ဟန့်တားနိုင်သည့် cyclooxygenase ၏တားဆေးဖြစ်သည်။PLA2 သည် thromboxane A2 ကိုပေါင်းစပ်ရန် arachidonic acid ကို hydrolyzing လုပ်ခြင်းဖြင့် platelet ပေါင်းစည်းမှုကို ဟန့်တားနိုင်သည်။Zhejiang ပြည်နယ်ရှိ Agkistrodon halys Pallas အဆိပ်မှထုတ်လုပ်သော PLA2 ၏ဖြေရှင်းချက်ဖွဲ့စည်းပုံအား စက်ဝိုင်းပုံ၊ မီးချောင်းနှင့် ခရမ်းလွန်ရောင်ခြည်စုပ်ယူမှုတို့ကို လေ့လာခဲ့သည်။စမ်းသပ်မှုရလဒ်များအရ ဤအင်ဇိုင်း၏အဓိကကွင်းဆက်ပုံစံသည် အခြားမျိုးစိတ်များနှင့်မျိုးရိုးမှတူညီသောအင်ဇိုင်းမျိုးများနှင့်ဆင်တူကြောင်း၊ အရိုးစုပုံစံသည် အပူဒဏ်ကိုကောင်းစွာခံနိုင်ရည်ရှိပြီး အက်ဆစ်ပတ်ဝန်းကျင်ရှိဖွဲ့စည်းပုံဆိုင်ရာပြောင်းလဲမှုကို ပြောင်းပြန်လှန်နိုင်သည်ဟု စမ်းသပ်ရလဒ်များကပြသခဲ့သည်။activator Ca2+ နှင့် အင်ဇိုင်းပေါင်းစပ်မှုသည် tryptophan အကြွင်းအကျန်များ၏ပတ်ဝန်းကျင်ကိုမထိခိုက်စေဘဲ inhibitor Zn2+ သည်ဆန့်ကျင်ဘက်လုပ်ဆောင်သည်။ဖြေရှင်းချက်၏ pH တန်ဖိုးသည် အင်ဇိုင်းလုပ်ဆောင်ချက်အပေါ် သက်ရောက်သည့်နည်းလမ်းမှာ အထက်ဖော်ပြပါ ဓာတ်ပစ္စည်းများနှင့် ကွဲပြားသည်။
မြွေအဆိပ်၏ PLA2 သန့်စင်ခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်တွင် ထင်ရှားသောဖြစ်စဉ်တစ်ခုမှာ မြွေအဆိပ်တွင် PLA2 elution peaks နှစ်ခု သို့မဟုတ် ထို့ထက်ပို၍ ပါဝင်နေခြင်းဖြစ်သည်။ဤဖြစ်စဉ်ကို အောက်ပါအတိုင်း ရှင်းပြနိုင်သည်- ① isozymes တည်ရှိမှုကြောင့်၊② PLA2 တစ်မျိုးကို အမျိုးမျိုးသော မော်လီကျူးအလေးချိန်များဖြင့် PLA2 အရောအနှောများအဖြစ် ပေါ်လီမာပြုလုပ်ထားပြီး အများစုမှာ 9 000 ~ 40 000 အကွာအဝေးတွင်ရှိသည်။③ PLA2 နှင့် အခြားမြွေအဆိပ်အစိတ်အပိုင်းများ ပေါင်းစပ်ခြင်းသည် PLA2 ကို ရှုပ်ထွေးစေသည်။④ PLA2 ရှိ amide bond သည် hydrolyzed ဖြစ်ခြင်းကြောင့်၊ charge သည် ပြောင်းလဲသွားသည်။① နှင့် ② သည် CrWa/w မြွေအဆိပ်ရှိ PLA2 ကဲ့သို့သော ခြွင်းချက်အနည်းငယ်မျှသာရှိပြီး၊
① နှင့် ② အခြေအနေနှစ်ခုရှိသည်။အောက်ဖော်ပြပါမြွေများ၏အဆိပ်တွင် PLA2 တွင်တတိယအခြေနေကိုတွေ့ရှိခဲ့သည်- Oxyranus scutellatus, Parademansia microlepidota, Bothrops a ^>er, Palestinian viper, sand viper, and rattlesnake km.
case ④ ၏ရလဒ်သည် electrophoresis ကာလအတွင်း PLA2 ၏ရွှေ့ပြောင်းမှုအမြန်နှုန်းကိုပြောင်းလဲစေသည်၊ သို့သော်အမိုင်နိုအက်ဆစ်ပါဝင်မှုမပြောင်းလဲပါ။Peptides သည် hydrolysis ဖြင့် ကွဲနိုင်သော်လည်း ယေဘုယျအားဖြင့် ၎င်းတို့ကို disulfide နှောင်ကြိုးများဖြင့် ချည်နှောင်ထားဆဲဖြစ်သည်။အရှေ့ဘက်တွင်းရှိ မြွေပွေး၏အဆိပ်တွင် အမျိုးအစား a နှင့် အမျိုးအစား p PLA2 ဟုခေါ်သော PLA2 ပုံစံနှစ်မျိုးရှိသည်။ဤ PLA2 အမျိုးအစားနှစ်ခုကြား ခြားနားချက်မှာ အမိုင်နိုအက်ဆစ်တစ်ခုသာဖြစ်သည်၊ ဆိုလိုသည်မှာ PLA2 မော်လီကျူးတစ်ခုတွင် glutamine ကို အခြား PLA2 မော်လီကျူးတွင် glutamic acid ဖြင့် အစားထိုးပါသည်။ဤကွာခြားချက်အတွက် အကြောင်းရင်းအတိအကျကို ရှင်းလင်းစွာမသိရသော်လည်း ၎င်းသည် PLA2 ကို ခွဲခြားသတ်မှတ်ခြင်းနှင့် ဆက်စပ်နေသည်ဟု ယေဘူယျအားဖြင့် ယုံကြည်ကြသည်။ပါလက်စတိုင်း မြွေပွေးအဆိပ်ရှိ PLA2 သည် အစိမ်းအဆိပ်ဖြင့် နွေးထွေးနေပါက ၎င်း၏ အင်ဇိုင်းမော်လီကျူးများမှ အဆုံးအုပ်စုများသည် ယခင်ထက် ပိုမိုများပြားလာမည်ဖြစ်သည်။မြွေအဆိပ်မှခွဲထုတ်ထားသော C PLA2 တွင် မတူညီသော N-terminal နှစ်ခုပါရှိပြီး ၎င်း၏မော်လီကျူးအလေးချိန်မှာ 30000 ဖြစ်သည်။ ဤဖြစ်စဉ်သည် PLA2 ၏ အရှေ့ဘက်စိန်နောက်ကျောမြွေ၏အဆိပ်တွင် PLA2 မှဖွဲ့စည်းထားသော အချိုးမညီသောအရောင်နှင့် ဆင်တူသည့် ဤဖြစ်စဉ်ကြောင့်ဖြစ်နိုင်သည်။ အနောက်ဘက်တွင် စိန်ပြန်မြွေ၊အာရှမြွေဟောက်သည် အမျိုးအစားခွဲများစွာဖြင့် ဖွဲ့စည်းထားပြီး အချို့မှာ အမျိုးအစားခွဲခြားရာတွင် အတိအကျမဖော်ပြထားပါ။ဥပမာအားဖြင့်၊ Cobra Outer Caspian မျိုးစိတ်ခွဲများကို ယခုတွင် အသိအမှတ်ပြုပါသည်။
Outer Caspian Sea Cobra လို့ သတ်မှတ်သင့်တယ်။မျိုးကွဲများစွာရှိ၍ ၎င်းတို့ကို ရောနှောပေါင်းစပ်ထားသောကြောင့် မြွေအဆိပ်၏ပါဝင်မှုမှာ မတူညီသောအရင်းအမြစ်များကြောင့် အလွန်ကွဲပြားပြီး PLA2 isozymes ၏ပါဝင်မှုလည်း မြင့်မားပါသည်။ဥပမာ မြွေဟောက်အဆိပ်
r^ll မျိုးစိတ်များ၏ PLA2 isozymes အနည်းဆုံး 9 မျိုးကို တွေ့ရှိခဲ့ပြီး မြွေဟောက် Caspian မျိုးစိတ်ခွဲများ၏ အဆိပ်တွင် PLA2 isozymes 7 မျိုးကို တွေ့ရှိခဲ့သည်။Durkin et al ။(၁၉၈၁) တွင် မြွေဟောက်အဆိပ် ၁၈ ကောင်၊ Mamba အဆိပ် ၃ ကောင်၊ မြွေပွေး ၅ ကောင်၊ မြွေဟောက်အဆိပ် ၁၆ ကောင်နှင့် ပင်လယ်မြွေ ၃ ကောင် အပါအဝင် မတူညီသောမြွေအဆိပ်များတွင် PLA2 ပါဝင်မှုနှင့် အိုင်ဆိုဇိုးမ်အရေအတွက်တို့ကို လေ့လာခဲ့သည်။ယေဘုယျအားဖြင့်၊ မြွေဟောက်အဆိပ်၏ PLA2 လုပ်ဆောင်ချက်သည် အိုင်ဆိုဇိုင်းများစွာဖြင့် မြင့်မားသည်။မြွေပွေးအဆိပ်၏ PLA2 လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် အိုင်ဆိုဇိုးမ်များသည် အလယ်အလတ်ဖြစ်သည်။Mamba အဆိပ်နှင့် မြွေပွေးအဆိပ်၏ PLA2 လုပ်ဆောင်ချက်သည် အလွန်နည်းသည် သို့မဟုတ် PLA2 လှုပ်ရှားမှုမရှိပါ။ပင်လယ်မြွေအဆိပ်၏ PLA2 လုပ်ဆောင်ချက်မှာလည်း နည်းပါးသည်။
မကြာသေးမီနှစ်များအတွင်း၊ မြွေအဆိပ်တွင် PLA2 သည် အရှေ့တောင်တက်ရိုးဖိုရာကျိုက်ထီးရိုးကဲ့သို့ တက်ကြွသောအလင်းရောင်ပုံစံဖြင့် တည်ရှိနေကြောင်း (C. မြွေအဆိပ်တွင် type a နှင့် type P PLA2 ပါရှိသည်၊ နှစ်ခုစလုံးသည် တူညီသော subunits နှစ်ခုဖြင့်ဖွဲ့စည်းထားသည်၊ နှင့် dimerase သာရှိသည်။
လှုပ်ရှားမှု။Shen et al ။မြွေအဆိပ်၏ PLA2 ၏ dimer သည် အင်ဇိုင်း၏ တက်ကြွသောပုံစံဖြစ်ကြောင်းလည်း အဆိုပြုခဲ့သည်။အနောက်ဘက်ခြမ်းရှိ လိပ်မြွေ၏ PLA2 သည် မှိန်မာပုံစံဖြင့် ရှိနေကြောင်း spatial တည်ဆောက်ပုံကို လေ့လာခြင်းသည်လည်း သက်သေပြပါသည်။စူးရှသောဒြပ်ပေါင်း
မြွေအဆိပ်၏ မတူညီသော PLA^Ei နှင့် E2 နှစ်မျိုးရှိပြီး၊ ၎င်းတွင် 仏 သည် dimer ပုံစံတွင်ရှိပြီး၊ dimer သည် တက်ကြွနေပြီး ၎င်း၏ dissociated monomer သည် မလှုပ်ရှားပါ။Lu Yinghua et al ။(၁၉၈၀) သည် E. Jayanthi et al ၏ ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာနှင့် ဓာတုဂုဏ်သတ္တိများနှင့် တုံ့ပြန်မှု kinetics ကို ထပ်မံလေ့လာခဲ့သည်။(၁၉၈၉) ခုနှစ်တွင် အခြေခံ PLA2 (VRVPL-V) ကို မြွေပွေးအဆိပ်မှ ခွဲထုတ်ခဲ့သည်။မိုနိုမာ PLA2 ၏ မော်လီကျူးအလေးချိန်သည် 10000 ဖြစ်ပြီး သေစေတတ်သော၊ သွေးခဲခြင်းကို တိုက်ဖျက်ခြင်းနှင့် ဖောရောင်ခြင်း သက်ရောက်မှုများရှိသည်။အင်ဇိုင်းသည် PH 4.8 ၏ အခြေအနေအောက်တွင် မတူညီသော မော်လီကျူးအလေးများဖြင့် ပိုလီမာများကို ပိုလီမာဖြစ်အောင် ထုလုပ်နိုင်ပြီး ပိုလီမာ၏ ပိုလီမာအသွင်အပြင်နှင့် မော်လီကျူးအလေးချိန် ဒီဂရီသည် အပူချိန်တိုးလာသည်နှင့်အမျှ ပိုလီမာများကို တိုးလာစေသည်။96°C တွင် ထုတ်ပေးသော ပိုလီမာ၏ မော်လီကျူးအလေးချိန်သည် 53 100 ဖြစ်ပြီး ဤပိုလီမာ၏ PLA2 လုပ်ဆောင်ချက်သည် နှစ်ဆတိုးလာသည်။
ပို့စ်အချိန်- Nov-18-2022